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影響生化檢測的常見因素分析
除疾病之外，還有許多因素也可影響生化檢測的結(jié)果。這些因素可能在分析過程的前中后。下面是yjbys小編為大家?guī)淼年P(guān)于影響生化檢測的常見因素分析的知識，歡迎閱讀。
分析前因素
分析前因素與病患本身，樣本收集，樣本處理等因素相關(guān)，這些因素通常會影響到分析前體液樣本的組成。包括以下幾個方面：
生物因素：病患與生具來的且可被控制的因素。
非生物學(xué)因素：包括樣本收集，處理，儲存，抗凝劑的使用。
分析中因素
分析中因素是能夠影響分析程序的因素。
干擾因素：脂血癥，溶血，黃疸，高蛋白血癥，藥物。以及其他更多情況。
質(zhì)量控制：確保測試操作和結(jié)果的準(zhǔn)確性。
分析后因素涉及到實驗室數(shù)據(jù)呈現(xiàn)、存儲和傳遞給臨床醫(yī)生的不同方式。
只要有可能，盡量控制以上三類因素，減少對實驗結(jié)果的影響。
1、分析前因素
在實驗室分析樣品之前，分析前因素影響樣品的組成(因此也將影響樣品質(zhì)量)。
這些因素是實驗室分析中最重要和最常見的誤差來源，卻常在分析實驗數(shù)據(jù)時被忽略。
應(yīng)該盡量控制這些因素，減少對實驗結(jié)果的影響。控制分析前因素包括獸醫(yī)或技師進(jìn)行樣本的充分采集，準(zhǔn)備和處理。當(dāng)然也存在一些不能被控制的因素，例如評估疾病引起的結(jié)果時，必須考慮并識別物種的遺傳性生理差異。
分析前因素包括生物性和非生物性因素。
1.1 生物性因素
某些因素是動物固有的，例如品種，年齡，和性別。但在評估檢測結(jié)果時需考慮。記住，實驗室提供的絕大多數(shù)的參考值適用于健康的成年動物。獸醫(yī)可以控制其他生理性因素，例如當(dāng)準(zhǔn)備血液樣本時，確保動物已禁食12小時。
1.1.1 固有的生物性因素
物種：物種特異性導(dǎo)致分析來源和分析結(jié)果都存在顯著差異。例如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是小動物而不是大動物的肝特異性酶。因此，必須將動物的生化結(jié)果與相同物種的參考區(qū)間進(jìn)行比較，例如，不能使用馬的參考區(qū)間來分析驢的生化結(jié)果。
品種：生化分析中存在與品種相關(guān)的差異，但這些差異通常較小。健康馱馬比純種良馬通常肌酸激酶值更高。
年齡：許多生化分析成分隨年齡而變化，幼畜生化結(jié)果經(jīng)常有變化，但不是因為疾病，而是與年齡有關(guān)，比如所有動物幼畜的堿性磷酸酶都偏高。一般來說，由臨床病理學(xué)實驗室提供的大多數(shù)參考范圍多通過成年動物確定，不太適用于幼齡動物。
性別：雌性動物懷孕或哺乳相關(guān)的生理狀態(tài)，可在非疾病狀態(tài)下影響分析結(jié)果。在一些物種中，可能存在不同性別的單獨參考區(qū)間，例如，人體內(nèi)的血清鐵。一般來說，家畜幾乎沒有與性別相關(guān)的檢測偏差。
1.1.2 可控的生物性因素
樣本采集技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化可以使這些因素對生化檢測結(jié)果的影響最小化。如果這些因素是不可避免的或被需要的(例如，在運動后采集樣品以檢測馬中的橫紋肌溶解癥)，結(jié)果分析期間必須考慮這些因素。
近期食物攝入：這將導(dǎo)致餐后脂血。脂血可能影響某些血漿成分的測量分析方法，從而導(dǎo)致結(jié)果無效。可以通過禁食12小時收集適當(dāng)?shù)臉悠穪肀苊獠秃笾Ｊ聦嵣希澈笾呤抢^發(fā)于疾病的脂質(zhì)異常代謝的有利證據(jù)。
最近的進(jìn)食可能影響與脂血癥無關(guān)的某些血漿成分濃度，例如葡萄糖。這種效應(yīng)因為食物代謝的差異(例如非反芻與反芻動物相比)存在明顯的物種依賴性。
應(yīng)激：應(yīng)激(繼發(fā)于動物處理或潛在疾病)將對實驗室結(jié)果產(chǎn)生較大影響。應(yīng)對幼齡或未馴化動物的應(yīng)激尤為重要，在采集血液樣本時應(yīng)可能降低動物應(yīng)激。
運動：運動對于血漿成分的影響取決于運動的類型和強度。一般而言，應(yīng)該在動物運動之前進(jìn)行血液樣本的采集。
藥物：給藥方式，例如肌肉內(nèi)給藥將直接影響分析結(jié)果。藥物本身也可干擾被分析物的測量。
1.1.3 藥物干擾
可分成兩大類：藥物的生理作用(體內(nèi))或代謝物對被分析物的影響
在體外，藥物及其代謝物的某些物理或化學(xué)性質(zhì)也會干擾實際檢測過程。對檢測能產(chǎn)生顯著干擾的治療藥物是血紅蛋白類氧載體(HBOC)，例如血液增強劑Oxyglobin。它是從牛血清中發(fā)現(xiàn)的一種呈黑紅色的聚合血紅蛋白。因為這種化合物的固有顏色，Oxyglobin在治療貧血動物可造成相同于血漿/血清溶血的情況。它在血液學(xué)，生化和尿檢的結(jié)果中都產(chǎn)生了明顯的干擾，在生化檢測中的干擾取決于檢測方式和儀器的使用。制造商正在努力開發(fā)新的方法來補償或消除來自HBOCs的干擾，因此未來可能在給予HBOCs的動物中也能獲得精確的檢測結(jié)果。這提示我們血液樣品應(yīng)在給予貧血動物HBOC之前收集，以盡量減少對檢測結(jié)果的影響。
實驗室應(yīng)該被告知任何治療藥物的使用，以此可采取措施降低藥物造成的影響。然而，獸醫(yī)學(xué)中關(guān)于藥物對動物或分析技術(shù)有哪些影響還了解甚少，除了例如皮質(zhì)類固醇，溴化物的例子。所以，任何異常的生化檢測結(jié)果應(yīng)該結(jié)合動物完全的用藥史分析。
1.2 非生理性因素
非生理因素包括樣本采集，處理和運輸。應(yīng)盡量控制這些因素以減少對實驗室結(jié)果的影響。
1.2.1 樣本采集
靜脈穿刺：清潔的靜脈穿刺是減少人為誤差的重要條件之一。錯誤的靜脈穿刺技術(shù)可能引起溶血，從而通過多種方式導(dǎo)致檢測結(jié)果產(chǎn)生誤差。例如高鉀紅細(xì)胞將導(dǎo)致鉀假性升高，紅細(xì)胞中AST導(dǎo)致AST假性升高(比如貓)，檢測過程中化學(xué)反應(yīng)釋放相關(guān)成分導(dǎo)致CK假性增高。止血試驗中錯誤的靜脈穿刺產(chǎn)生的組織因子將污染樣品，導(dǎo)致樣品管中的沉淀凝血，以無法預(yù)知的方式延長或縮短凝血時間測定。可通過將血液直接收集到檸檬酸鹽抗凝血劑(預(yù)填充注射器或直接進(jìn)入真空采血管)中減少誤差影響。
抗凝劑：抗凝劑將影響檢測結(jié)果。
血液檢測：最好使用EDTA抗凝血劑，檸檬酸鹽將稀釋樣本，肝素將引起細(xì)胞凝集，兩者都將減少計數(shù)。
生化檢測：肝素化血漿或血清(無抗凝血劑)樣品適用于生化檢測。因為同一患者的血漿與血清的檢測結(jié)果不同。所以如果需要連續(xù)監(jiān)測同一患者，應(yīng)使用相同的樣品。血漿里含有纖維蛋白原，而血清中沒有(在凝血期間移除)，因此檢測結(jié)果里血漿的總蛋白(和球蛋白，因為纖維蛋白原是β球蛋白)的結(jié)果比血清高。凝血期間鉀從血小板中釋放，因此血清鉀高于血漿鉀(后者結(jié)果更準(zhǔn)確)。氟化物-草酸鹽抗凝劑可用于葡萄糖的測量，它會抑制細(xì)胞代謝，應(yīng)馬上將血清/血漿從細(xì)胞分離，因為該抗凝血劑會誘發(fā)嚴(yán)重的溶血。檸檬酸鹽和EDTA抗凝劑不適用于生化檢測，因為它們會螯合二價陽離子(鈣，鎂)并含有高濃度的鈉(檸檬酸鹽)或鉀(EDTA)。即使是在輕度EDTA污染的血液樣品中進(jìn)行生化檢測都會出現(xiàn)超高鉀和超低鈣的結(jié)果。一些酶的活性也需要二價陽離子。因此，在含有EDTA或檸檬酸鹽做抗凝劑的血漿中，這些酶(例如堿性磷酸酶)的檢查結(jié)果會虛假偏低。
凝血測試：最好使用檸檬酸抗凝劑(對鈣有輕度螯合作用，因此鈣可以回到樣本中以進(jìn)行凝血篩選測定)。不能使用肝素(樣品不會凝結(jié))，EDTA可以使用(鈣可以回到樣本中)，但不是很可靠所以不推薦使用。
1.2.2 樣本處理和儲存
樣品收集后，應(yīng)嚴(yán)格注意樣品處理，以盡量減少這些因素對結(jié)果的影響。
分離：只要有可能，尤其是當(dāng)樣品收集和實驗室送檢之間有延遲時，應(yīng)在樣品收集后盡快分離細(xì)胞中的血清或血漿。包括使樣品凝結(jié)(對于血清)和離心樣品以分離出血液組分。應(yīng)該將血清或血漿從細(xì)胞中分離并置于新的凝集(無抗凝血劑)管中。管應(yīng)標(biāo)記為“血漿”或“血清”。未與細(xì)胞分離的樣品具有較低的葡萄糖濃度(在儲存期間由細(xì)胞消耗)，即使沒有明顯的溶血，濃度較高的一些成分，將從紅細(xì)胞中滲出，例如馬血液中的鉀。血清分離器(或Corvac)的專用管，材料含有硅膠，可以將血清和凝塊分離。即使使用這些管，仍應(yīng)該取出血清并放置到新的凝血管中，尤其當(dāng)專用管不是全新狀態(tài)(硅膠如果裂開也將影響樣本)。
標(biāo)記：患者的所有體液樣品應(yīng)正確標(biāo)記好患者姓名，標(biāo)識和樣品類型(例如血清，血漿，滑液，腹膜液)。實驗室不負(fù)責(zé)樣品的正確標(biāo)記，可以想象，一個不正確的標(biāo)簽標(biāo)本將對病人護(hù)理產(chǎn)生多么嚴(yán)重和有害的后果。
儲存：一般情況下，通常從樣品收集到實驗室送檢之間至少有24小時的延遲。因此，從細(xì)胞中快速分離血清/血漿和保持樣品冷卻(使用冰袋)對于保持酶活性最大化和防止結(jié)果出現(xiàn)誤差是非常有必要的。如果預(yù)計長時間(> 24小時)，建議將樣品冷凍，并使用干冰將樣品運輸至實驗室。樣本存儲的方法取決于樣本檢測類型，一些樣品凍結(jié)也不是很穩(wěn)定，所以應(yīng)該經(jīng)常向?qū)嶒炇易稍儾煌瑯颖镜膬Υ娣椒ā?/p>
2、分析中因素
分析中因素通過影響儀器測量分析物的過程。由于儀器類型的差異，不同實驗室會對檢測結(jié)果產(chǎn)生不同影響。分析因素由樣品固有屬性引起，例如血脂的干擾，或分析儀本身的固有特征。儀器本身的誤差可通過實驗室的質(zhì)量保證程序降至最小化。
干擾
脂血，游離血紅蛋白(溶血)，黃疸(高膽紅素)，高球蛋白和藥物，這些內(nèi)源性物質(zhì)對檢測結(jié)果的干擾程度取決于儀器類型、檢測方法以及樣品中的干擾物質(zhì)數(shù)量(即實驗室特異性)。在康奈爾大學(xué)臨床病理學(xué)實驗室中使用的化學(xué)分析儀將測量樣品中脂血，溶血和黃疸的含量，并將這些值作為指數(shù)，用于評價這三種內(nèi)源性干擾物質(zhì)對化學(xué)結(jié)果的影響程度。
高蛋白血癥：單克隆免疫球蛋白(副蛋白)，特別是當(dāng)以高濃度存在時，通過以下機(jī)制干擾生化分析：
高粘度：影響樣品體積，粘度取決于免疫球蛋白的類別(免疫球蛋白如何形成高粘度，為何形成?)
與被檢測物結(jié)合：與一些被檢測物結(jié)合的免疫球蛋白將增加或減少分析成分，例如已經(jīng)有一例犬慢性淋巴細(xì)胞白血病和犬IgM單克隆丙種球蛋白病病例中發(fā)現(xiàn)了高磷酸鹽血。
體積變化：這類似于脂血癥的影響。什么疾病導(dǎo)致單克隆丙種球蛋白病?
藥物：給藥方式不同的藥物干擾可能使結(jié)果產(chǎn)生偏差。在獸醫(yī)學(xué)中最常見的藥物干擾之一是犬溴化物(抗驚厥藥)療法，檢測樣品的氯化物值將人為升高。臨床獸醫(yī)應(yīng)該告知實驗室使用在待檢動物身上的的任何藥物，這有助于減少藥物對化學(xué)測試的影響(但通常不會消除)。
檢測程序
控制和最小化影響測定性能的因素包括質(zhì)量保障。
臨床病理實驗室的目標(biāo)是提供準(zhǔn)確和精確的結(jié)果。質(zhì)量保證是通過實施清楚明確的實驗室操作規(guī)程和質(zhì)量控制程序來實現(xiàn)。
質(zhì)量控制程序取決于測量對照血清中被分析物的濃度(同預(yù)定的分析物值對比)。通常落在預(yù)定(可接受)限度之外的控制值表示程序存在問題。康奈爾大學(xué)的臨床病理學(xué)實驗室每天都會對分析儀器進(jìn)行對照檢測。除非對照值在可接受的范圍內(nèi)，否則不對患者樣品進(jìn)行分析。此外，實驗室參與外部質(zhì)量控制計劃，分析未知樣品時候，會將結(jié)果與使用相同儀器的其他實驗室的結(jié)果進(jìn)行比較。如果本校實驗室的結(jié)果與平均值的偏差較大，表明存在程序性問題，應(yīng)即時糾正。
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