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有關(guān)阿魏酸糖酯抗氧化性的研究
摘要： 本文測定了合成阿魏酸糖脂的抗氧化性，結(jié)果表明用0.62％的阿魏酸糖脂浸泡的蘋果，阿魏酸葡糖酯抑制效應(yīng)在處理后4天最明顯，抑制率為36.92%，阿魏酸木糖酯抑制效應(yīng)在處理后8天最明顯，抑制率為 19.47%。對于果實(shí)的內(nèi)源乙烯釋放，經(jīng)阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯處理的蘋果分別推遲乙烯釋放高峰期6天和4天。關(guān)鍵詞： 阿魏酸葡糖酯；阿魏酸木糖脂；抗氧化性；脂氧合酶
The antioxygenation of ferulaic acid glycolipide
LV Xiao-zhuo, JIANG Wei, WU Zan-min.School of Public Health, Tianjin Medical University, Tianjin 300070,China
【Abstract】 The resistance to oxidation of synthetical ferulaic acid glycolipide was investigated. The result was shown, apple was dipped in 0.62% ferulaic acid glycolipide, the most inhibitor effectiveness of glucose ferulaic esters and xylose ferulaic ester was shown respectively to be 36.92% after four days and 19.47% after eight days, the fastigium of release ethane was postponed respectively to be six days and four days.
【Key words】 Glucose ferulaic esters; xylose ferulaic ester; antioxygenation; Lipoxygenase
植物的衰老行為中的主要矛盾是活性氧，乙烯的產(chǎn)生和脂氧合酶（Lipoxygenase，簡稱LOX）起了協(xié)同作用［1,2］，所以抗氧保鮮劑，主要考察對脂氧化酶活性的抑制，及對乙烯的抑制作用，這樣可能達(dá)到預(yù)期的效果。由于阿魏酸及其衍生物是一種營養(yǎng)性的安全可靠的食品添加劑，本文通過蘋果考察了合成阿魏酸葡糖酯的抗氧化性，即利用紫外光譜和氣相色譜法系統(tǒng)的考察了阿魏酸對脂氧化酶活性的抑制和內(nèi)源乙烯釋放的抑制效果，通過測試證實(shí)阿魏酸糖酯具有較好的抗氧化性，探索開發(fā)出一種安全高效的果蔬保鮮劑。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1．1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器 阿魏酸葡萄糖酯，阿魏酸木糖脂（天津工業(yè)大學(xué)提供）； 亞油酸（化學(xué)純，許昌元化生物科技有限公司）； 氫氧化鈉（分析純，天津市東麗區(qū)天大化學(xué)試劑廠）；乙酸-乙酸鈉緩沖液（0.1mol/L，pH4.6～5.8）；磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液（0.1mol/L,pH5.8～7.4）；紫外光度計(jì)［UV-2401PC，島津儀器（蘇州）有限公司］；氣相色譜儀（GC-Agilent 6890N， 美國安捷倫科技有限公司）；高速離心機(jī)（LG10-2.4A型，北京醫(yī)用離心機(jī)廠）
1．2 實(shí)驗(yàn)方法
1．2．1 蘋果的處理 將5g左右的合成阿魏酸葡糖酯或阿魏酸木糖酯加熱溶于800ml去離子水中待溫度降至室溫時(shí)，將反復(fù)洗過無傷、大小均一的最新市售的紅富士蘋果浸入到濃度約為0.62%的溶液中，待5min后取出，室溫下放置待測。
1．2．2 底物的制備 10mmol/L亞油酸鈉（反應(yīng)底物）溶液的制取［3］：稱取70mg的亞油酸鈉， 7ml TritonX-100和4ml無氧水，用0.5mol/L氫氧化鈉滴定至溶液澄清，定容25ml，分裝于1.5ml的安瓿瓶中，-18℃保存?zhèn)溆谩?BR> 1．2.3 粗酶液的提取 稱取2.0g果肉放入研缽中，在液氮中充分研磨，然后將研缽內(nèi)的果肉轉(zhuǎn)移至離心試管中，取9ml緩沖液充分沖洗研缽后將其轉(zhuǎn)至離心試管中。在10000r/min下離心15min，取上層清液。
1．2．4 LOX活性最適pH值的測定 本文通過紫外分光光度計(jì)測定LOX活性最高時(shí)的pH值［4，5］，具體方法是：將一定pH值的緩沖液作參比進(jìn)行基線測定，然后取0.025ml 10mmol/L亞油酸鈉溶液，緩沖液2.775ml和相應(yīng)緩沖液下酶液0.200ml混合均勻，在30℃恒溫水浴中反應(yīng)1min。立即測定吸光度值A(chǔ)1并計(jì)時(shí)，過1min后，記錄吸光度值A(chǔ)2。兩次測量的差值(A2- A1)為ΔA。
LOX活性單位 ： 酶活力 果肉質(zhì)量×反應(yīng)時(shí)間
LOX活性單位：ΔOD234nm×g-1min-1
由于每次取果肉為2.0g， ΔOD=ΔA×1000 2
本實(shí)驗(yàn)以1min內(nèi)3ml體系在234nm的吸光度增加0.001作為一個(gè)酶活力單位（U），波長設(shè)定為234nm；測定不同緩沖液下的LOX活性，需要重新校正基線。
1．2．5 阿魏酸糖酯對LOX活性的影響 分別提取未用阿魏酸糖酯處理的、用阿魏酸葡糖酯處理的及用阿魏酸木糖酯處理的蘋果果肉的粗酶液，將最適pH值的緩沖液倒入比色皿中，進(jìn)行基線測定，然后移取0.025ml亞油酸鈉，緩沖液2.775ml，酶液0.200ml于樣品池中，在30℃恒溫水浴中反應(yīng)1min，立即測量A1并計(jì)時(shí)，過1min后，再進(jìn)行測量A2,求出ΔA，每隔2天進(jìn)行測量1次，持續(xù)22天。
1．2．6 乙烯的定性與定量 本實(shí)驗(yàn)中利用氣相色譜通過純乙烯對果肉釋放的乙烯進(jìn)行定性和定量，定量分析采用氣相色譜外標(biāo)法［6］ 。
氣相色譜條件［7］：進(jìn)樣量8
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